超薄切片

编辑:水蛭网互动百科 时间:2020-01-27 20:03:28
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超薄切片(Ultrathin sectioning) 系供电子显微镜[1]  观察用的切片。由于电子穿透组织的能力低, 所以供电子显微镜观察用的切片要求极薄(一般厚度为40~50 nm) ,即为超薄切片[2] 
中文名
超薄切片
外文名
ultrathin section
领    域
应用科学
学    科
生物学
专    业
医学,动物学,植物学
相关技术
电子显微镜,超薄切片技术

超薄切片前言

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为了观察生物体的微细结构,电子显微镜所用的超薄切片, 需要经过了解取材的基本要求,取材和制备超薄切片的过程, 即为透射电镜[1]  标本(超薄切片)的制备[3] 

超薄切片取材的基本要求

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组织从生物活体取下以后,如果不立即进行适当处理,会由于细胞内部各种酶的作用,出现细胞自溶现象。此外,还可能由于污染,微生物在组织内繁殖使细胞的微细结构遭受破坏。因此,为了使细胞结构尽可能保持生前状态,必须做到快、小、准、冷:
(1).动作迅速,组织从活体取下后应在最短时间内 (争取在1分钟内) 投入2.5%戊二醛固定液
(2).所取组织的体积要小,一般不超过1mm×1mm×1mm。也可将组织修成1mm×1mm×2mm大小长条形。因
固定剂的渗透能力较弱,组织块如果太大,块的内部将不能得到良好的固定。
(3).机械损伤要小,解剖器械应锋利,操作宜轻,避免牵拉、挫伤与挤压。
(4).操作最好在低温(0℃~4℃)下进行,以降低酶的活性,防止细胞自溶
(5).取材部位要准确。

超薄切片取材

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将取出的组织放在洁净的蜡版上,滴一滴预冷的固定液,用两片新的、锋利的刀片成“拉锯式”将组织切下并修小,然后用牙签或镊子将组织块移至盛有冷的固定液的小瓶中。如果组织带有较多的血液和组织液,应先用固定液洗几遍,然后再切成小块固定。

超薄切片超薄切片的制备

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制备超薄切片的设备为超薄切片机,使用的刀为玻璃刀或钻石刀。为了能切成薄片,包埋标本的包埋剂一定要达到一定的硬度,通常是用树脂聚合包埋。
方法与步骤:锇酸戊二醛固定样品->丙酮逐级脱水->环氧树脂包埋_>以热膨胀或机械伸缩的方式切片_>重金属(铀,铅)盐染色.
参考资料
  • 1.    John J. Bozzola, Lonnie D. Russell.Electron Microscopy:Jones & Bartlett Learning,1998
  • 2.    中国农业百科全书总编辑委员会.中国农业百科全书 之136 制作电镜超薄切片.北京:中国农业百科全书编辑部,1988
  • 3.    Norman Reid, Julian E. Beesley.Sectioning And Cryosectioning For Electron Microscopy (Practical Methods In Electron Microscopy):Elsevier Science Ltd,1991
词条标签:
自然学科 科技术语 科技 科学 生物物种 理学 学科